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目的 探讨地西他滨对人肝癌细胞(HepG2)细胞株DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)、DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)、P53基因的表达水平的影响及其临床意义.方法 采用不同浓度地西他滨(0、3、6μmol/L)培养HepG2细胞株48 h,采用流式细胞学方法检测细胞凋亡情况,甲基化特异性聚合酶链反应(MA-PCR)检测P53基因甲基化状态,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测甲基转移酶DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、P53基因在3种不同浓度地西他滨中的表达水平.结果 处理后DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA与P53甲基化水平均呈地西他滨剂量依赖性的活性下调,两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而P53表达水平与地西他滨浓度呈依赖性的活性上调(P<0.05).结论 地西他滨可以通过抑制DNA甲基转移酶表达,下调P53甲基化水平,维持P53抑癌基因活性,从而抑制肝癌细胞HepG2的增值过程.

作者:王远鹤;马作红;傅熙博

来源:临床军医杂志 2019 年 47卷 6期

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王远鹤;马作红;傅熙博
来源:
临床军医杂志 2019 年 47卷 6期
标签:
甲基转移酶 DNA甲基转移酶1 DNA甲基转移酶3A DNA甲基转移酶3B P53 地西他滨 肝癌细胞
目的 探讨地西他滨对人肝癌细胞(HepG2)细胞株DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)、DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)、P53基因的表达水平的影响及其临床意义.方法 采用不同浓度地西他滨(0、3、6μmol/L)培养HepG2细胞株48 h,采用流式细胞学方法检测细胞凋亡情况,甲基化特异性聚合酶链反应(MA-PCR)检测P53基因甲基化状态,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测甲基转移酶DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、P53基因在3种不同浓度地西他滨中的表达水平.结果 处理后DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA与P53甲基化水平均呈地西他滨剂量依赖性的活性下调,两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而P53表达水平与地西他滨浓度呈依赖性的活性上调(P<0.05).结论 地西他滨可以通过抑制DNA甲基转移酶表达,下调P53甲基化水平,维持P53抑癌基因活性,从而抑制肝癌细胞HepG2的增值过程.