目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)沉默对人端粒酶逆转录酶(hTERT)的抑制作用,以及其与肺癌放疗敏感性的关系.方法 建立稳定转染细胞系(H-1299)和HMGB1沉默(H-1299-shHMGB1)细胞系,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测HMGB1 mRNA的表达.根据处理方式不同将细胞分为对照组(无X射线照射,转染空白质粒),HMGB1 KO组(转染HMGB1-shRNA,敲除HMGB1),KO+5 Gy组(转染HMGB1-shRNA,敲除HMGB1,照射剂量5 Gy),KO+10 Gy组(转染HMGB1-shRNA,敲除HMGB1,照射剂量10 Gy).应用噻唑蓝(MTT)和克隆形成实验分析HMGB1对肺癌细胞H-1299增殖和放射敏感性的影响.采用划痕损伤实验、Transwell实验和流式细胞仪检测HMGB1对放射诱导的肿瘤细胞迁移、侵袭、细胞周期和凋亡的影响.通过蛋白免疫印迹法分析HMGB1沉默对hTERT表达的影响.结果 与正常肺泡上皮细胞BEAS-2B比较,HMGB1在肺癌细胞H-1299中表达显著上调(P<0.05).10 Gy放疗48、96 h后,HMGB1均较对照组显著降低(P<0.05).MTT与细胞克隆形成实验结果 显示,HMGB1沉默后,随着放疗剂量增加,H-1299细胞活力显著降低(P<0.05).划痕实验结果 显示,HMGB1沉默后,随着放疗剂量增加,H-1299细胞迁移所受影响越明显(P<0.05).Transwell实验结果 显示,HMGB1沉默后,随着放疗剂量增加,H-1299细胞侵袭能力显
作者:徐莹;吕东阳;任雪;阎英;李玲
来源:临床军医杂志 2021 年 49卷 2期