目的制备出高效价的抗重组人表皮生长因子(EGF)单克隆抗体.方法以重组人表皮生长因子作为抗原,免疫Balb/c小鼠,以未免疫的Balb/c小鼠脾细胞为饲养细胞,运用细胞杂交瘤技术制备,间接ELISA法筛选产生针对人表皮生长因子的单克隆抗体细胞株;以体内诱生法产生腹水,并采用Protein A-Sepharose柱对其纯化,快速定性试纸鉴定McAb的Ig亚类,采用间接ELISA法相加实验鉴定抗原识别表位.结果获得3株产生针对人表皮生长因子的单克隆抗体细胞株EGF-B2、EGF-C7、EGF-A8,Ig亚分别为IgG1κ型,IgG1λ型,IgG3κ型,亲和力常数分别为2.76×1010、3.2×109、1.45×109.结论成功制备3株稳定分泌抗rhEGF的杂交瘤细胞株,产生的MoAb特异性好,亲和力高,为探讨EGF的作用机制及临床应用奠定了基础,为肿瘤的诊断与治疗提供具有实用价值的研究工具,此外,为EGF的纯化提供实验材料.
作者:罗萍;邹全明;王晓勤;马颖
来源:免疫学杂志 2004 年 20卷 4期