目的构建表达pCDR1 Th表位的可口服减毒鼠伤寒沙门菌株.方法全基因合成pCDR1两条核苷酸链,在C端加上6-His标签,退火互补后插入原核表达载体pYA3149中,构建重组质粒pR1,将该重组质粒转入鼠沙门菌终宿主菌株X4550,获得杂合菌株X4550(pR1).体外诱导表达后斑点印迹鉴定表位肽的表达.结果酶切鉴定和基因序列测定显示重组质粒构建成功.体外诱导后6 h细菌裂解上清液中,检测到表位肽的表达,该蛋白能与鼠抗His单克隆抗体特异结合.重组菌株在体外营养选择压力下,可较稳定地携带重组质粒传代繁殖.结论成功构建了能稳定表达pCDR1 Th表位的可口服减毒鼠伤寒沙门菌株.
作者:周春丽;郝进;唐书谦;钟白玉;叶庆佾;邓军;曾韦锟;郝飞
来源:免疫学杂志 2006 年 22卷 2期