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目的:研究豚鼠早期实验性近视眼视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞前部及后极部碱性成纤维细胞生长因子( basic fibroblast growth factor,bFGF)的改变,探索近视的发病机制。方法:两周龄豚鼠30只随机分为A组、B组、C组,每组10只,再随机选取5只10眼正常两周龄豚鼠不作任何干预,作为正常对照眼。选取任意眼戴一-10.00 D凹透镜,分别饲养6、15、30 d后除去镜片,验光及测眼轴长度确定近视形成后,采用细胞酶消化法培养豚鼠的前部及后极部RPE细胞,取3~6代RPE细胞进行免疫细胞化学、实时荧光定量PCR、Western-blot蛋白印迹法检查前部及后极部RPE细胞中bFGF表达变化。结果:bFGF的表达定位于细胞浆和细胞核。免疫细胞化学、实时荧光定量PCR、Western-blot蛋白印迹法结果均表明:A、B、C三组实验眼和对照眼前部及后极部RPE细胞均有bFGF的表达,实验组前部及后极部与对照组相应前部及后极部比较,实验组中bFGF的阳性率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而且,随着诱导时间的推移,实验组的阳性率逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05),对照组的阳性率不变,差异无统计学意义(P>0.05);但实验组和对照组各组自身前部及后极部比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:实验组前部及后极部与对照组相应前

作者:陈博宇;王超英;陈维毅;刘迎庆;郝岚

来源:国际眼科杂志 2015 年 11期

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作者:
陈博宇;王超英;陈维毅;刘迎庆;郝岚
来源:
国际眼科杂志 2015 年 11期
标签:
豚鼠 视网膜色素上皮细胞 碱性成纤维细胞生长因子 免疫细胞化学 实时荧光定量PCR Western-blot蛋白印迹法 guinea pig retinal pigment epithelial cells basic fibroblast growth factor immunocytochemistry Real - Time PCR Analysis Western blotting
目的:研究豚鼠早期实验性近视眼视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞前部及后极部碱性成纤维细胞生长因子( basic fibroblast growth factor,bFGF)的改变,探索近视的发病机制。方法:两周龄豚鼠30只随机分为A组、B组、C组,每组10只,再随机选取5只10眼正常两周龄豚鼠不作任何干预,作为正常对照眼。选取任意眼戴一-10.00 D凹透镜,分别饲养6、15、30 d后除去镜片,验光及测眼轴长度确定近视形成后,采用细胞酶消化法培养豚鼠的前部及后极部RPE细胞,取3~6代RPE细胞进行免疫细胞化学、实时荧光定量PCR、Western-blot蛋白印迹法检查前部及后极部RPE细胞中bFGF表达变化。结果:bFGF的表达定位于细胞浆和细胞核。免疫细胞化学、实时荧光定量PCR、Western-blot蛋白印迹法结果均表明:A、B、C三组实验眼和对照眼前部及后极部RPE细胞均有bFGF的表达,实验组前部及后极部与对照组相应前部及后极部比较,实验组中bFGF的阳性率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而且,随着诱导时间的推移,实验组的阳性率逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05),对照组的阳性率不变,差异无统计学意义(P>0.05);但实验组和对照组各组自身前部及后极部比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:实验组前部及后极部与对照组相应前