目的:观察体外高糖诱导环境,对人视网膜色素上皮细胞中内脏脂肪素(Visfatin)的表达影响,以及研究高糖环境下重楼皂苷Ⅰ(PolyphyllinⅠ)对Visfatin表达情况的影响.方法:人视网膜色素上皮细胞培养后分3组,正常对照组、高糖组和高糖加PolyphyllinⅠ药物干预组,干预培养12h后进行检测.正常对照组:5.5mmol/L葡萄糖浓度常规培养;高糖组:将25mmol/L的高糖加入培养基建立模型;高糖加PolyphyllinⅠ药物干预组:高糖25mmol/L和3μg/L PolyphyllinⅠ药物加入培养基.免疫荧光染色法观察人视网膜色素上皮细胞中Visfatin和血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达;实时荧光定量PCR检测上皮细胞中Visfatin和VEGF mRNA的表达;Western-blot法检测上皮细胞中Visfatin和VEGF蛋白的表达.结果:免疫荧光检测发现Visfatin和VEGF在正常组视网膜色素上皮细胞中表达呈弱阳性.但在高糖组视网膜色素上皮中可见Visfatin和VEGF呈强阳性表达.药物干预组中Visfatin和VEGF荧光较高糖组明显减弱.RT-PCR显示高糖组Visfatin mRNA表达水平较正常组和干预组明显增高(t=4.24、3.89,均P<0.05).高糖组VEGF mRNA表达水平较正常组和干预组明显增高(t=3.53、2.57,均P<0.05).Western-blot结果示Visfatin蛋白水平,高葡萄糖组表达量显著高于正常对照组(t=3.62,P=0.
作者:邵义男;路强;杨晓静
来源:国际眼科杂志 2020 年 20卷 12期