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目的观察凋亡素基因(VP3)在卵巢癌细胞株CoC1中诱导凋亡的情况.方法用KpnⅠ、XbaⅠ分别双酶切pMD18-CAVP3和pcDNA3.1(+),分别回收365 bp和5.0 kb大小的片断,然后常规行连接反应,构建重组凋亡素真核表达载体pcDNA3.1-VP3.采用LipofectamineTM 2000介导的基因转染法,在体外将pcDNA3.1-VP3转染入卵巢癌细胞株CoC1中,RT-PCR检测凋亡素在细胞中的表达,用流式细胞仪检测细胞凋亡.结果酶切鉴定及测序结果表明重组凋亡素真核表达载体pcDNA3.1-VP3构建成功. RT-PCR证实VP3基因在CoC1中存在并在转录水平表达.转染pcDNA3.1-VP3细胞凋亡率明显高于转染空质粒组(P<0.01).结论凋亡素可有效诱导卵巢癌细胞CoC1凋亡.

作者:苏海英;曹建国;谢宛玉

来源:南华大学学报(医学版) 2005 年 33卷 4期

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作者:
苏海英;曹建国;谢宛玉
来源:
南华大学学报(医学版) 2005 年 33卷 4期
标签:
鸡贫血病毒 凋亡素 细胞凋亡 卵巢癌
目的观察凋亡素基因(VP3)在卵巢癌细胞株CoC1中诱导凋亡的情况.方法用KpnⅠ、XbaⅠ分别双酶切pMD18-CAVP3和pcDNA3.1(+),分别回收365 bp和5.0 kb大小的片断,然后常规行连接反应,构建重组凋亡素真核表达载体pcDNA3.1-VP3.采用LipofectamineTM 2000介导的基因转染法,在体外将pcDNA3.1-VP3转染入卵巢癌细胞株CoC1中,RT-PCR检测凋亡素在细胞中的表达,用流式细胞仪检测细胞凋亡.结果酶切鉴定及测序结果表明重组凋亡素真核表达载体pcDNA3.1-VP3构建成功. RT-PCR证实VP3基因在CoC1中存在并在转录水平表达.转染pcDNA3.1-VP3细胞凋亡率明显高于转染空质粒组(P<0.01).结论凋亡素可有效诱导卵巢癌细胞CoC1凋亡.