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目的 研究缺氧是否通过上调缺氧诱导因子1α(HIF-1α)水平而调控前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)表达并诱导神经细胞凋亡.方法 分别用0、125、250、500μmol/L氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞,蛋白印迹法检测其PCSK9及HIF-1α表达;Hoechst33258核染色及流式细胞术检测CoCl2对PC12细胞凋亡的影响.用250μmol/L CoCl2处理PC12细胞0、6、12、24 h,蛋白印迹法检测其PCSK9及HIF-1α表达.不同浓度HIF-1α激动剂二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)或HIF-1α抑制剂利非西呱(YC-1)处理PC12细胞24 h,检测PCSK9、HIF-1α、胱天蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9的表达及对PC12细胞凋亡的影响.PC12细胞经PCSK9 siRNA转染后与250μmol/L CoCl2孵育,检测对PC12细胞凋亡的影响及PCSK9、HIF-1α、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达.结果 PC-SK9、HIF-1α的表达及细胞凋亡程度呈CoCl2浓度与时间依赖性增高.PC12细胞中HIF-1α和PCSK9的表达呈DMOG浓度依赖性增高,Caspase-3、Caspase-9表达及PC12细胞凋亡率呈DMOG浓度依赖性降低;PC12细胞中HIF-1α和PCSK9的表达呈YC-1浓度依赖性降低,Caspase-3、Caspase-9表达及PC12细胞凋亡率呈YC-1浓度依赖性升高.与空白组及无义RNA组比较,PCSK9 siRNA转染组Caspase-3、Caspase-9表达减少,凋亡程度降低.结论

作者:刘录山;邓懿铭;李清

来源:中南医学科学杂志 2021 年 49卷 4期

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作者:
刘录山;邓懿铭;李清
来源:
中南医学科学杂志 2021 年 49卷 4期
标签:
前蛋白转化酶枯草溶菌素9 缺氧诱导因子-1α 凋亡 缺氧 缺氧缺血性脑损伤
目的 研究缺氧是否通过上调缺氧诱导因子1α(HIF-1α)水平而调控前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)表达并诱导神经细胞凋亡.方法 分别用0、125、250、500μmol/L氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞,蛋白印迹法检测其PCSK9及HIF-1α表达;Hoechst33258核染色及流式细胞术检测CoCl2对PC12细胞凋亡的影响.用250μmol/L CoCl2处理PC12细胞0、6、12、24 h,蛋白印迹法检测其PCSK9及HIF-1α表达.不同浓度HIF-1α激动剂二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)或HIF-1α抑制剂利非西呱(YC-1)处理PC12细胞24 h,检测PCSK9、HIF-1α、胱天蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9的表达及对PC12细胞凋亡的影响.PC12细胞经PCSK9 siRNA转染后与250μmol/L CoCl2孵育,检测对PC12细胞凋亡的影响及PCSK9、HIF-1α、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达.结果 PC-SK9、HIF-1α的表达及细胞凋亡程度呈CoCl2浓度与时间依赖性增高.PC12细胞中HIF-1α和PCSK9的表达呈DMOG浓度依赖性增高,Caspase-3、Caspase-9表达及PC12细胞凋亡率呈DMOG浓度依赖性降低;PC12细胞中HIF-1α和PCSK9的表达呈YC-1浓度依赖性降低,Caspase-3、Caspase-9表达及PC12细胞凋亡率呈YC-1浓度依赖性升高.与空白组及无义RNA组比较,PCSK9 siRNA转染组Caspase-3、Caspase-9表达减少,凋亡程度降低.结论