目的 制备转染乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因、人外周血单个核细胞(PBMC)来源的树突状细胞(DC)疫苗,观察HBcAg的表达效率,检测其在体外诱导的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)对HepG2.2.15细胞的杀伤效应.方法 体外诱导并培养DC;将HBcAg基因导入DC,检测HBcAg的表达率;将基因转染后的DC与自体淋巴细胞混合培养,MTT法检测其对HepG2.2.15细胞的杀伤毒力.结果 成功培养了人外周血PBMC来源的DC,并通过脂质体的方法获得表达HBcAg的特异性DC疫苗,脂质体转染后DC的的形态未发生明显变化,CD83表达增加,与对照组比较有显著性差异.HBcAg基因转染DC后72 h的HBcAg表达率为55.8%;MTT法检测特异性细胞毒作用结果显示,试验组效靶比为10∶1、20∶1、40∶1的杀伤率分别为(62.5±4.8)%、(71.8±5.3)%、(81.5±5.0)%,与空转组、未转组比较,均有统计学差异(均P<0.05).结论 应用阳离子脂质体能有效地将HBcAg基因转染到人PBMC来源的DC,转染HBcAg基因的DC具有诱导CTL体外杀伤HepG2.2.15细胞的作用.
作者:孔练花;李军;韩亚萍;刘源;黄祖瑚
来源:东南国防医药 2011 年 13卷 6期