目的 应用荧光定量PCR技术检测食品中沙门菌,为病原监测和快速诊断提供实验依据.方法 选择沙门菌invA基因设计引物,应用SYBR(R) Green Ⅰ染料建立荧光定量PCR法.分别对61株沙门菌、14株非沙门菌以及食品模拟标本、市售禽蛋制品进行检测,观察方法的特异性、敏感性和可行性.结果 建立的荧光定量PCR法检测所有沙门菌均出现了特异的熔解曲线,扩增产物的熔点值79.6 ℃左右；目标菌DNA的扩增产物循环数(Ct值)为20,空白对照及非沙门菌的Ct值大于30,非沙门菌均未出现特异的熔解曲线.每反应最低检测的沙门菌数是31 CFU;对食品中人工污染的沙门菌的检测,最低检测量是l CFU,检测时间为7～8h,与培养法比较,阳性符合率100％；对市售的369份禽蛋制品进行检测,阳性结果19份,而细菌培养法检测阳性结果为12份.结论 基于SYBR(R) Green Ⅰ染料建立的荧光定量PCR检测沙门菌是敏感、特异、省时、省力的方法,适用于沙门菌快速检测.
作者：梁洪军；李晶；王永山；魏德江；陈琼；周东明；唐雨德
来源：东南国防医药 2013 年 15卷 3期
