目的: 获得大量CEA694-702-β2-微球蛋白(β2m)融合蛋白,并制备HLA-CEA694-702复合体.方法: 通过引物设计在β2m基因的5′端引入CEA694-702序列和Linker序列,并将目的基因克隆到质粒pET28a中,在BL21(DE3)中表达.CEA694-702-β2m和HLA重链蛋白用金属螯合亲和层析法进行纯化,并经稀释复性法复性.制备的HLA-CEA694-702复合体用PEG20000浓缩,应用ELISA鉴定其构象,并用尺寸排阻色谱纯化和鉴定.结果: HLA重链蛋白和CEA694-702-β2m蛋白经金属螯合亲和层析法纯化后纯度提高.ELISA鉴定结果表明稀释复性后HLA-CEA694-702复合体形成了正确的构象.利用尺寸排阻色谱对HLA-CEA694-702复合体成功地进行了纯化.结论: 利用CEA694-702-β2m融合蛋白成功制备出HLA-CEA694-702复合体,为HLA-CEA694-702四聚体的制备奠定了基础.
作者：孟凡岩；沈传来；郭薇；缪凤琴；谢维；张建琼
来源：东南大学学报（医学版） 2009 年 28卷 5期
