目的：建立肠道病毒71型（ EV71）特异性检测的免疫荧光方法用于病毒分离培养后的EV71鉴定，为EV71生物学特征研究和疫苗株的筛选奠定基础。方法：以EV71 VP1为免疫原制备单克隆抗体，用经测序鉴定的肠道病毒毒株建立EV71特异性免疫荧光方法；将不同地区收集的手足口病患儿的临床标本进行病毒分离，利用EV71特异性单抗进行分离培养后的病毒鉴定。结果：制备获得2株单抗，经鉴定其中1株3 E12为EV71特异性单抗；以此单抗建立的免疫荧光方法对EV71感染细胞呈阳性反应，而与柯萨基病毒A16和埃可病毒6等非EV71肠道病毒不反应。从104份手足口病临床标本中共分离到35株病毒，产生肠道病毒典型的细胞病变；用3E12特异性单抗免疫荧光鉴定分离病毒，其中29株为EV71，与RT-PCR验证结果完全一致。结论：成功制备获得EV71特异性单克隆抗体，以此单抗建立的EV71特异性免疫荧光方法敏感性高、特异性强，可用于分离培养EV71的鉴定。
作者：吴菲菲；董敏；葛路遥；胡馨云；张程；张建华；江炳福；孟继鸿
来源：东南大学学报（医学版） 2013 年 6期
