目的:近来凋亡抑制蛋白c-FLIP( L)作为新的抗肿瘤治疗靶点受到关注,为了探讨c-FLIP( L)在肺癌细胞迁移中的作用,我们建立了c-FLIP( L)高表达稳定细胞株,以比较c-FLIP( L)在肺癌细胞株中表达水平与其细胞迁移能力的关系。方法:采用非小细胞肺癌A549细胞株进行转染c-FLIP( L)真核表达质粒,通过G418筛选出多株c-FLIP( L)高表达单克隆,以此为平台研究c-FLIP( L)在肿瘤细胞迁移过程中的作用。通过实时荧光定量QPCR及Western Blot检测稳定株中c-FLIP( L)表达水平;划痕实验及Transwell法检测c-FLIP( L)高表达对肺癌细胞迁移的影响,并通过荧光骨架蛋白染色观察细胞形态的改变。结果:QPCR和Western Blot显示A549稳定细胞株中c-FLIP( L)均为高表达;Wound healing和Transwell实验表明c-FLIP ( L)高表达肺癌细胞迁移能力明显上升,并初步探索了c-FLIP( L)表达对细胞骨架的影响。结论:凋亡抑制蛋白c-FLIP( L)的高表达能促进肺癌A549细胞的迁移。
作者:刘万;郑倩倩;华子春;张晶
来源:东南大学学报(医学版) 2015 年 4期