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目的:筛选靶向Survivin基因的抗肿瘤siRNA前体药物,并且探讨其抑制肿瘤细胞侵袭和迁移的分子机制.方法:采用MTT法检测Survivin siRNA脂质体对非小细胞肺癌细胞株H1299、肝癌细胞株SMMC-7721、甲状腺癌细胞株8505C、乳腺癌细胞株MCF-7、结肠腺癌细胞株HCT-116和食管癌细胞株EC109增殖的抑制作用,选择对Survivin-siRNA最敏感的8505C细胞株进行后续研究;分别采用划痕法和Transwell法测定Survivin-siRNA对8505C细胞株迁移和侵袭的影响,采用RT-PCR法和Western blotting测定Survivin-siRNA对8505C细胞株Survivin、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和粘着斑激酶(FAK) mRNA和蛋白水平表达的影响.结果:(1) Survivin-siRNA对H1299、SMMC-7721、8505C、MCF-7、HCT-116和EC109细胞株均有一定程度的抑制作用,其中对8505C细胞株抑制作用最强(IC50=5.83 μg·ml-1);(2)癌细胞迁移实验中,Survivin-siRNA可剂量依赖性增大划痕刻度(P<0.05);(3)癌细胞侵袭实验中,Survivin-siRNA可剂量依赖性减少穿膜细胞数量;(4)在RT-PCR实验中,Survivin-siRNA可剂量依赖性降低8505C细胞株中Survivin、MMP-9和FAK mRNA表达;(5)在Western blotting实验中,Survivin-siRNA可剂量依赖性降低8505C细胞株中Survivin、MMP-9和FAK蛋白表达.结论:Survivin-si

作者:周伟华

来源:东南大学学报(医学版) 2018 年 37卷 5期

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作者:
周伟华
来源:
东南大学学报(医学版) 2018 年 37卷 5期
标签:
Survivin-siRNA 抗肿瘤 肿瘤迁移 肿瘤侵袭 Survivin MMP-9 FAK
目的:筛选靶向Survivin基因的抗肿瘤siRNA前体药物,并且探讨其抑制肿瘤细胞侵袭和迁移的分子机制.方法:采用MTT法检测Survivin siRNA脂质体对非小细胞肺癌细胞株H1299、肝癌细胞株SMMC-7721、甲状腺癌细胞株8505C、乳腺癌细胞株MCF-7、结肠腺癌细胞株HCT-116和食管癌细胞株EC109增殖的抑制作用,选择对Survivin-siRNA最敏感的8505C细胞株进行后续研究;分别采用划痕法和Transwell法测定Survivin-siRNA对8505C细胞株迁移和侵袭的影响,采用RT-PCR法和Western blotting测定Survivin-siRNA对8505C细胞株Survivin、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和粘着斑激酶(FAK) mRNA和蛋白水平表达的影响.结果:(1) Survivin-siRNA对H1299、SMMC-7721、8505C、MCF-7、HCT-116和EC109细胞株均有一定程度的抑制作用,其中对8505C细胞株抑制作用最强(IC50=5.83 μg·ml-1);(2)癌细胞迁移实验中,Survivin-siRNA可剂量依赖性增大划痕刻度(P<0.05);(3)癌细胞侵袭实验中,Survivin-siRNA可剂量依赖性减少穿膜细胞数量;(4)在RT-PCR实验中,Survivin-siRNA可剂量依赖性降低8505C细胞株中Survivin、MMP-9和FAK mRNA表达;(5)在Western blotting实验中,Survivin-siRNA可剂量依赖性降低8505C细胞株中Survivin、MMP-9和FAK蛋白表达.结论:Survivin-si