目的为在大肠杆菌表达幽门螺杆菌CagA蛋白,建立ELISA法检测CagA抗体,克隆幽门螺杆菌cagA基因片段.方法根据cagA基因序列,设计引物PCR扩增cagA基因片段,用T-A克隆的方法将PCR产物克隆入质粒载体pGEM-T,并转化大肠杆菌JM109.结果经蓝白斑筛选,PCR及限制性内切酶酶切分析,获得cagA基因片段的克隆,序列测定结果与文献报道一致.结论PCR产物可采用T-A法克隆,获得的阳性重组体可用于进一步的表达等研究.
作者:李崇勇;张一鸣;徐顺福
来源:南京医科大学学报(自然科学版) 2000 年 20卷 6期