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目的:建立稳定表达外源野生型p53(wtp53)基因的人胆囊癌细胞系.方法:在脂质体lipofectamineTM2000介导下,将含有wtp53的真核表达质粒pCMV-p53导入胆囊癌细胞系GBC-SD中.经G418筛选抗性克隆,扩大培养,建立转染克隆细胞系.用聚合酶链反应(PCR)证实外源野生型p53基因的整合,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法分析目的基因及其蛋白表达.结果:野生型p53基因成功地导入胆囊癌细胞系GBC-SD,转染细胞中存在外源p53基因及蛋白的稳定表达.结论:GBC-SD胆囊癌细胞株能稳定表达外源野生型p53基因.

作者:乌新林;施琳;罗力;孙晓风;董培德

来源:内蒙古医学院学报 2005 年 27卷 3期

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作者:
乌新林;施琳;罗力;孙晓风;董培德
来源:
内蒙古医学院学报 2005 年 27卷 3期
标签:
胆囊肿瘤 p53基因 基因表达 细胞系
目的:建立稳定表达外源野生型p53(wtp53)基因的人胆囊癌细胞系.方法:在脂质体lipofectamineTM2000介导下,将含有wtp53的真核表达质粒pCMV-p53导入胆囊癌细胞系GBC-SD中.经G418筛选抗性克隆,扩大培养,建立转染克隆细胞系.用聚合酶链反应(PCR)证实外源野生型p53基因的整合,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法分析目的基因及其蛋白表达.结果:野生型p53基因成功地导入胆囊癌细胞系GBC-SD,转染细胞中存在外源p53基因及蛋白的稳定表达.结论:GBC-SD胆囊癌细胞株能稳定表达外源野生型p53基因.