目的:观察腺相关病毒介导人碱性成纤维细胞因子(bFGF)基因转染对人骨髓基质细胞(hMSCs)成骨能力的影响.方法:从健康志愿者全骨髓中分离培养人骨髓基质细胞,体外扩增纯化后随机分为4组.①腺相关病毒介导人碱性成纤维细胞因子(AAV - bFGF)组:培养液中加入人碱性成纤维细胞因子基因重组腺相关病毒1×10100PU/ml,孵育24h后换普通培养液继续培养；②β半乳糖酐酶基因重组腺相关病毒(AAV - LacZ)组:用半乳糖酐酶基因重组腺相关病毒替换bFGF,其余处理与AAV - bFGF组相同；③阳性对照组:培养液中添加地塞米松(1 nmoL/L)、抗坏血酸(10mmol/L)和β-甘油磷酸钠(50mg/L)；④空白对照组:不给予特殊处理.各组细胞处理后2wk,免疫组化观察bFGF表达,Von Kossa染色检测人骨髓基质细胞中骨胶原结节形成,全自动生化分析仪检测培养上清碱性磷酸酶(ALP)活性.结果:经多次换液传代,人骨髓基质细胞呈均一梭形形态.处理后AAV - bFGF组与阳性对照组细胞形态逐渐趋于扁平,突起减少.AAV - LacZ组和空白对照组形态无明显变化.免疫组化染色见bFGF主要在胞浆内表达,AAV - bFGF组bFGF表达明显强于其他3组.von Kossa染色AAV - bFGF组与阳性对照组可见大量红色骨胶原结节形成,显著多于AAV - LacZ组和空白对照组.培养上清液ALP活性检测AAV - b
作者：周荣兴；郭军；吕慧成；李晓东；杨铁翼
来源：内蒙古医学院学报 2012 年 34卷 1期
