目的 证实糖原合成酶激酶3β(GSK3β)通过影响促凋亡因子、线粒体通透性转运孔(mPTP)、细胞色素C(CytC)表达参与脂肪乳救治布比卡因所致的大鼠心肌细胞凋亡.方法 采用RNA干扰(RNAi)腺病毒法,H9C2大鼠心肌细胞复苏培养后,以1×105个/mL细胞密度接种于96孔板上,采用随机数字表法分为8个组:空白对照组(C组)、布比卡因组(B组)、脂肪乳组(LE组)、布比卡因+脂肪乳组(B+LE组)、空白对照组+GSK3βRNAi腺病毒(GSK3βi)组(C+GSK3βi组)、布比卡因+GSK3βi组(B+GSK3βi组)、脂肪乳+GSK3βi组(LE+GSK3βi组)、布比卡因+脂肪乳+GSK3βi组(B+LE+GSK3βi组).B组、LE组、B+LE组分别用终浓度为1 mmol·L-1布比卡因、1%脂肪乳、1 mmol·L-1布比卡因+1%脂肪乳的培养基孵育.C+GSK3βi组、B+GSK3βi组、LE+GSK3βi组、B+LE+GSK3βi组经GSK3βi腺病毒感染后第2 d给予以上药物孵育.药物孵育24 h后采用Western blot法检测Bad和CytC蛋白表达,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用激光共聚焦显微镜观察钙黄绿素荧光强度值(mPTP开放情况).结果 与C组比较,B组Bad、CytC蛋白表达水平和细胞凋亡率均增加,钙黄绿素荧光强度值下降(P均<0.05);与B组比较,LE组、B+LE组Bad、CytC蛋白表达水平和细胞凋亡率均下降,钙黄绿素荧光强度值增加(P均<0
作者:吕丹妮;摆志霞;陈学新
来源:宁夏医科大学学报 2020 年 42卷 9期