目的 观察大鼠肝实质细胞与Kupffer细胞体外共同培养时对两者生长、形态及功能的影响.方法 采用原位二步Ⅳ型胶原灌注法、Percoll液密度梯度离心法分离Wistar大鼠肝实质细胞与Kupffer细胞;体外将肝实质细胞与Kupffer细胞按6∶1比例共同培养.观察不同情况下肝细胞生存时间和形态,每隔24 h检测培养上清液中清蛋白和谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的水平,并在培养36 h用放免法检测上清液中白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)含量.结果 单独培养组肝细胞的生长、增殖迅速,并向正常肝细胞的形态演变,肝细胞可培养存活至15 d;共同培养组肝细胞生长增殖缓慢,细胞可培养存活至10 d.共同培养组上清液中清蛋白水平在24、36、48、60 h比单独培养组低(t=2.551～ 3.139,P<0.05);ALT、AST水平在24、36、48、60 h比单独培养组高(t=2.446～3.108,P<0.05);共同培养组Kupffer细胞保持IL-1、IL-6、TNF-α分泌功能,而单独培养组未检测到IL-1、IL-6、TNF-α.结论 大鼠Kupffer细胞和肝实质细胞在适宜的培养条件下可进行共同培养,二者可以保持良好的分泌功能,可用于实验研究.
作者：寇晨光；曹成波；燕晓雯；罗兵；周岩冰
来源：青岛大学医学院学报 2010 年 46卷 4期
