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目的 研究糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚同蛋白CD59、CD55在脂筏介导 T 细胞信号转导通路中的作用.方法 应用 siRNA 技术,构建针对 CD55 与 CD59 基因的重组载体pSUPER-siCD55、pSUPER-siCD59.实验分为未转染的Jurkat 细胞组(Ⅰ组)、转染pSUPER-siCD59重组质粒的Jurkat细胞组(Ⅱ组)及转染pSUPER-siCD55 重组质粒的 Jurkat 细胞组(Ⅲ组).RT-PCR 方法检测转染细胞中CD55和CD59基因mRNA的表达.噻唑蓝(MTT)比色法和激光共聚焦扫描显微镜分别检测 CD55 与 CD59 联合作用对3组Jurkat细胞的增殖效应以及细胞内钙离子的变化.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组细胞CD59和Ⅲ组细胞CD55 mRNA 的表达均明显减少(F=595.14、699.06.q=45.70~47.25,P<0.05).Ⅰ组细胞 CD55 与 CD59 联合作用后增殖能力和钙离子浓度均明显高于Ⅱ组、Ⅲ组(F=97.02、189.47,q=13.69~26.39,P<0.01),Ⅱ组低于Ⅲ组(q=5.43、6.42,P<0.05).结论 CD59 和 CD55 在 T 细胞活化信号转导通路中存在协同效应,其中 CD59 起到重要作用.

作者:聊菲;高美华;张蓓;解西河

来源:青岛大学医学院学报 2011 年 47卷 2期

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作者:
聊菲;高美华;张蓓;解西河
来源:
青岛大学医学院学报 2011 年 47卷 2期
标签:
抗原,CD59 抗原,CD55 Jurkat细胞 信号传导 协同作用
目的 研究糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚同蛋白CD59、CD55在脂筏介导 T 细胞信号转导通路中的作用.方法 应用 siRNA 技术,构建针对 CD55 与 CD59 基因的重组载体pSUPER-siCD55、pSUPER-siCD59.实验分为未转染的Jurkat 细胞组(Ⅰ组)、转染pSUPER-siCD59重组质粒的Jurkat细胞组(Ⅱ组)及转染pSUPER-siCD55 重组质粒的 Jurkat 细胞组(Ⅲ组).RT-PCR 方法检测转染细胞中CD55和CD59基因mRNA的表达.噻唑蓝(MTT)比色法和激光共聚焦扫描显微镜分别检测 CD55 与 CD59 联合作用对3组Jurkat细胞的增殖效应以及细胞内钙离子的变化.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组细胞CD59和Ⅲ组细胞CD55 mRNA 的表达均明显减少(F=595.14、699.06.q=45.70~47.25,P<0.05).Ⅰ组细胞 CD55 与 CD59 联合作用后增殖能力和钙离子浓度均明显高于Ⅱ组、Ⅲ组(F=97.02、189.47,q=13.69~26.39,P<0.01),Ⅱ组低于Ⅲ组(q=5.43、6.42,P<0.05).结论 CD59 和 CD55 在 T 细胞活化信号转导通路中存在协同效应,其中 CD59 起到重要作用.