目的 探讨人血清中抗非半乳糖(Gal)异种抗原抗体的最佳检测条件.方法 选用α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除(GTKO)五指山小型猪的外周血单核细胞(PBMC)作为靶细胞,与健康人血清混合,在不同血清浓度(4.8％、16.7％、100％)和孵育时间(0.5、1.0、2.0、3.0、6.0h)条件下,利用流式细胞仪检测GTKO猪的PBMC上结合IgM和IgG的水平.结果 在16.7％血清浓度下,孵育时间从0.5 h延长至3.0 h,能显著提高非Gal IgM结合PBMC的水平(P＜0.01),而IgG水平的提高则差异无统计学意义(P＞0.05).提高血清浓度也可提高非Gal IgM的结合水平,采用100％的血清浓度孵育3h,IgM结合PBMC水平最高且有统计学意义(P＜0.01).采用100％的血清孵育6h,IgG结合水平升高有统计学意义(P＜0.05).延长孵育时间和提高血清浓度不会影响PBMC的活力.结论 检测人血清中抗非Gal异种抗原抗体的最佳条件为每1×105个猪PBMC,采用100％人血清浓度孵育3h检测IgM水平,或加100％人血清浓度孵育6h检测IgG水平.这一条件的优化有助于筛选非Gal表达抗原低表达的供体猪.
作者：叶学军；卢希彬；潘登科；蔡志明；牟丽莎；赵成江
来源：器官移植 2017 年 8卷 2期
