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目的:以抑制性消减杂交技术分离高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞Hca-F和Hca-P间差异表达的基因.方法:采用抑制性消减杂交技术,以高低转移力小鼠肝癌细胞Hca-F为检测子,以低转移力Hca-P细胞为驱赶子,分离高转移力癌细胞中高表达的基因的cDNA片段.将差异表达基因的cDNA片段插入T/A克隆载体,并通过热转化的方法转化大肠埃希菌DH-5α,建立了高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞间抑制性消减杂交文库.以菌液PCR的方法检测随机挑选的白色菌落中插入片段的出现频率.提取14个重组质粒进行序列分析.结果:在消减文库中共获800个白色菌落,对随机挑选的160个白色菌落进行菌液PCR扩增,发现95

作者:侯力;唐建武;崔晓楠;王波;宋波;孙雷

来源:中华肿瘤防治杂志 2006 年 13卷 1期

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作者:
侯力;唐建武;崔晓楠;王波;宋波;孙雷
来源:
中华肿瘤防治杂志 2006 年 13卷 1期
标签:
肝肿瘤,试验性/病理学 肿瘤转移 癌基因 杂交
目的:以抑制性消减杂交技术分离高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞Hca-F和Hca-P间差异表达的基因.方法:采用抑制性消减杂交技术,以高低转移力小鼠肝癌细胞Hca-F为检测子,以低转移力Hca-P细胞为驱赶子,分离高转移力癌细胞中高表达的基因的cDNA片段.将差异表达基因的cDNA片段插入T/A克隆载体,并通过热转化的方法转化大肠埃希菌DH-5α,建立了高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞间抑制性消减杂交文库.以菌液PCR的方法检测随机挑选的白色菌落中插入片段的出现频率.提取14个重组质粒进行序列分析.结果:在消减文库中共获800个白色菌落,对随机挑选的160个白色菌落进行菌液PCR扩增,发现95