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目的:构建包含人cyclin G2基因的真核表达载体,并探讨其对人胃癌细胞体外生长的作用.方法:从POE4 细胞总RNA反转录产物中扩增出cyclin G2 cDNA,亚克隆至双顺反子真核表达载体pIRESneo中获得pIRES-G2重组质粒,基因转染SGC-7901细胞,G418 筛选阳性克隆,免疫蛋白印迹杂交方法检测cyclin G2蛋白表达情况,平板克隆形成能力和四甲基噻唑蓝(MTT)比色法对转染后细胞的增殖活性进行分析.结果:成功构建包含cyclin G2基因真核重组表达载体pIRES-G2;转染pIRES-G2 的SGC-7901细胞克隆的增殖活性明显下降.结论:cyclin G2基因转染后SGC-7901细胞体外增殖能力下降.

作者:刘洁;田玉楼;崔泽实;罗阳;满晓辉;张学

来源:中华肿瘤防治杂志 2006 年 13卷 5期

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作者:
刘洁;田玉楼;崔泽实;罗阳;满晓辉;张学
来源:
中华肿瘤防治杂志 2006 年 13卷 5期
标签:
细胞周期蛋白类 转染 胃肿瘤 基因
目的:构建包含人cyclin G2基因的真核表达载体,并探讨其对人胃癌细胞体外生长的作用.方法:从POE4 细胞总RNA反转录产物中扩增出cyclin G2 cDNA,亚克隆至双顺反子真核表达载体pIRESneo中获得pIRES-G2重组质粒,基因转染SGC-7901细胞,G418 筛选阳性克隆,免疫蛋白印迹杂交方法检测cyclin G2蛋白表达情况,平板克隆形成能力和四甲基噻唑蓝(MTT)比色法对转染后细胞的增殖活性进行分析.结果:成功构建包含cyclin G2基因真核重组表达载体pIRES-G2;转染pIRES-G2 的SGC-7901细胞克隆的增殖活性明显下降.结论:cyclin G2基因转染后SGC-7901细胞体外增殖能力下降.