目的:探索小鼠IL-18基因治疗肿瘤的方法和疗效.方法:构建pSecTag2B-mIL-18真核分泌表达载体,并用其转染HT-29细胞,RT-PCR和ELISA检测 IL-18 表达情况;将转染pSecTag2B-mIL-18质粒的HT-29培养上清,加入到小鼠T淋巴细胞培养液,ELISA、RT-PCR检测T淋巴细胞分泌IFN-γ;脂质体包被的pSecTag2B-mIL-18裸质粒,采用肌肉注射法转入Balb/c小鼠,检测IL-18蛋白表达情况;在Balb/c小鼠接种小鼠colon-26肿瘤细胞的同时, 将表达载体pSecTag2B-mIL-18转入,观察抑制肿瘤生长的情况.结果:1) 经酶切和测序鉴定, pSecTag2B-mIL-18真核分泌表达载体所表达的基因序列经比对完全正确.2) pSecTag2B-mIL-18转染 HT-29细胞后,IL-18在 mRNA和蛋白水平高表达.3)转染后的HT-29培养上清可刺激小鼠T淋巴细胞高水平分泌IFN-γ.4)用裸质粒肌肉注射法将pSecTag2B-mIL-18 转入Balb/c小鼠, 证明质粒均能够在小鼠肌肉中表达,且表达的蛋白均能分泌到外周血液循环中.5)接种colon26细胞的Balb/c小鼠,将pSecTag2B-mIL-18转入小鼠, 结果表明IL-18 单独应用能明显抑制肿瘤的生长.结论:pSecTag2B-mIL-18裸质粒肌肉注射具有显著的抗肿瘤作用.
作者：徐忠法；韩建军；宋希林；边家盛；管杰
来源：中华肿瘤防治杂志 2006 年 13卷 15期
