目的:构建针对Survivin基因的siRNA(small interference RNA)真核表达载体,并观察其对转染的膀胱癌细胞中Survivin基因表达和细胞凋亡的影响.方法:应用siRNA设计软件设计针对Survivin基因的特异性短链寡核甘酸,化学合成后经退火形成双链siRNA模板,通过克隆到质粒pSilencer 1.0-U6构建siRNA真核表达载体并用酶切和测序鉴定;然后将其转染人膀胱癌细胞株BIU-87,以反义Survivin寡核甘酸(ASODN)抑制效果为对照,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法和DNA原位末端标记(TUNEL)法检测BIU-87细胞生长抑制率(IR)和凋亡指数(AI),半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测BIU-87细胞中Survivin mRNA及其蛋白的表达.结果:酶切和测序证实siRNA真核表达载体构建成功.siRNA对BIU-87细胞的IR和AI(62.14
作者：曹正国；诸禹平；亓林；朱明；吴奎；董晓程；舒启安；肖峻
来源：中华肿瘤防治杂志 2006 年 13卷 22期
