目的:研究胃癌相关基因GCRG213在真核细胞的定位.方法:采用聚合酶链反应(PCR)技术,从pGEM-T质粒上选择性扩增出包含完整ORF在内的人胃癌相关基因GCRG213的DNA片段,将目的片段两端分别引入限制性内切酶PstI和BamHI识别位点,克隆至真核表达载体pEGFP-Nl.将测序正确的阳性重组子pEGFP-Nl-GCRG213采用脂质体瞬时转染COS-7细胞,激光共聚焦技术检测GCRG213基因在真核细胞内的蛋白定位.结果:经测序证实,GCRG213正确克隆入真核表达载体pEGFP-Nl,组成阳性重组子pEGFP-Nl-GCRG213.测序正确的pEGFP-N1-GCRG213重组子经脂质体转染COS-7细胞,激光共聚焦显微镜观察GCRG213蛋白在胞核和胞质中均有表达.结论:GCRG213蛋白在胞核和胞质中均有表达.
作者：高利利；王孟薇；吴本俨；周涛；黄海力；尤纬缔；王卫华
来源：中华肿瘤防治杂志 2007 年 14卷 2期
