目的:观察凋亡抑制蛋白Livin对于膀胱癌细胞系增殖和凋亡的影响.方法:采用脂质体转染法将Livin基因转入膀胱癌T24细胞系,经G418筛选后获得稳定表达Livin的亚克隆细胞系T24/Livin+及仅转染载体的T24/pcDNA3.1(+).应用Western blot RT-PCR法来检测Livin 在转染细胞中的表达;应用克隆形成试验检测细胞增殖活性;用丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)分别作用转染前后的膀胱癌细胞系24 h,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测转染前后细胞生长抑制率,应用流式细胞仪(FCM)及吖啶橙(AO)染色检测细胞凋亡.结果:成功建立了稳定表达Livin的亚克隆细胞系T24/Livin+及T24/pcDNA3.1(+).Western blot及RT-PCR法检测结果表明Livin在T24/Livin+中表达阳性,而在T24与T24/pcDNA3.1(+)中表达阴性.Livin的表达导致了膀胱癌细胞系更强的细胞增殖能力(P<0.01); 经MMC作用24 h后,T24/pcDNA3.1(+)与T24的细胞凋亡率分别为(21.38±2.27)
作者：刘海波；毕建斌；孔垂泽；刘贤奎；姜元军；杨春明；杨建勋
来源：中华肿瘤防治杂志 2008 年 15卷 6期
