目的:观察外源性PDCD5基因对骨肉瘤细胞系U2-OS的促凋亡作用.方法:扩增重组质粒PCI-neo-PDCD5,采用脂质体转染的方法,将PDCD5基因转染骨肉瘤细胞U2-OS,RT-PCR检测转染后表达情况;撤除血清培养16 h后,四甲基偶氮唑盐MTT法检测目的基因转染后细胞的增殖情况;Annexin V-染色流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质印迹法分析凋亡通路.结果:转染骨肉瘤细胞U2-OS后,RT-PCR检测到PDCD5的表达,MTT实验发现撤除血清后转染重组质粒组细胞的增殖被明显抑制.于转染空载体和对照组细胞相比,存活细胞明显减少,P<0.001.Annexin V染色,流式细胞仪检测可见明显的凋亡细胞,与转染空质粒组(凋亡率为1.47
作者:王海斌;孙永明;胥正权;田康松
来源:中华肿瘤防治杂志 2010 年 17卷 4期