目的:应用特异性小干扰RNA(siRNA)下调97-H细胞中脑源性神经生长因子(BDNF)表达,观察对细胞凋亡和侵袭的影响并探讨相关分子机制.方法:在人肝细胞癌(HCC)细胞系97-H中,采用蛋白质印迹法检测BDNF的表达,采用ELISA方法检测培养上清上BDNF的分泌水平.特异性BDNF-siRNA转染细胞,采用FITC-phalloidin染色方法检测actin细胞骨架的变化,采用western blot方法检测细胞内RhoA、Racl、Cdc42的活化情况.同时,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室测定细胞侵袭能力的变化.结果:97-H细胞培养上清中BDNF含量为(119.08±6.21) ρg/mL.在97-H细胞中,特异性BDNF-siRNA显著抑制BDNF的表达,干扰细胞内actin细胞骨架聚合,RhoA 或Rac1活性受到抑制,同时与对照组相比,凋亡细胞百分比增加至(27.00±1.71)％,P=0.000,侵袭细胞数减少至(26.9±1.6)％,P=0.000.结论:干扰BDNF的表达能显著降低HCC细胞侵袭能力,其机制可能与阻断actin细胞骨架聚合、以及RhoA或Rac1活化相关.BDNF信号通路可能作为阻断HCC发展演进的新靶点,有待于进一步深入研究.
作者：郭大伟；姜晓峰；孙文郁；朱磊；张弘彬；侯学忠；梁健
来源：中华肿瘤防治杂志 2012 年 19卷 17期
