目的:探讨去甲基化试剂5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5 azac)上调RUNX3基因表达后,食管癌Eca109细胞生物学行为的改变.方法:体外培养Eca109细胞,应用10、20和50 μmol/L较低浓度的5-azac干预72h,实时定量PCR及蛋白质印迹法检测RUNX3基因的mRNA及蛋白表达水平改变;甲基化特异性PCR检测RUNX3基因的甲基化程度变化;细胞划痕、Transwell实验观察Eca109细胞迁移及侵袭能力的改变;裸鼠成瘤实验观察体内Eca109细胞移植瘤生长的变化.结果:经10、20和50μmol/L 5-azac干预72 h后,RUNX3基因的mRNA表达水平分别增加2.18±0.23、4.57±0.26和6.90±0.36倍;RUNX3蛋白表达相对系数分别为0.196±0.004、0.278±0.013和0.396±0.025.Eca109细胞经5-azac处理后,部分RUNX3基因去甲基化.0、20和50 μmol/L 5-azac干预72 h后,RUNX3基因的去甲基化条带亮度值比值分别为0.125±0.003、1.791±0.112和2.987±0.236,P＜0.001.0、10、20和50μmol/L 5-azac干预72 h后,Eca109细胞运动至划痕处细胞数分别为715±20.1、398±19.3、302±16.4和124±13.8.相比于对照组,10、20和50 μmol/L干预组迁移细胞数百分率分别为62％、46％和12％,侵袭细胞数百分率为60％、45％和8％.RUNX3基因表达上调后,Eca109细胞裸鼠体内移植瘤生长减慢,F=67.5,P

作者：王帅；陈华夏；王洲

来源：中华肿瘤防治杂志 2014 年 21卷 9期