目的 利用RNA干扰技术特异性抑制乳腺癌MCF-7细胞中血管内皮生因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)的基因表达,体内外实验研究下调VEGF-C后对乳腺癌增殖及淋巴结转移的影响.方法 利用重组质粒pSIREN VEGF-C转染乳腺癌MCF 7细胞并筛选稳定表达细胞株,观察转染前后MCF-7细胞中VEGF-C基因的表达情况及对细胞增殖的影响;以稳定表达细胞株建立乳腺癌裸鼠原位移植瘤模型并观察下调VEGF-C基因后对肿瘤淋巴管生成及肿瘤生长转移的影响.结果 转染重组质粒后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C mRNA及蛋白表达均明显下调,抑制率分别为95% (P<0.001)和100%,P=0.018.转染后的MCF-7细胞增殖明显受抑制,P<0.05.转染细胞移植瘤的淋巴管生成明显减少,重组质粒组移植瘤中的LMVD为18.23±1.56,较空白对照组的34.50±1.13明显减少,P<0.001;生长速度较对照组缓慢,重组质粒组平均成瘤时间为(14.00±2.13)d,较空白对照组(7.92±1.95)d时间长,P=0.021;重组质粒组肿瘤体积为(706±58) mm3,低于空白对照组(1 285±262) mm3,P=0.020;重组质粒组的转移淋巴结数目为0.45±0.23,明显低于空白对照组1.50±0.45,P=0.021.结论 表达VEGF-C shRNA的重组质粒载体pSIREN-VEGF-C在体内外均能高效、特异地发挥靶基因沉默作用,并对乳
作者:谢晓斌;陈小卫;龙捷;王红艳;张雅洁
来源:中华肿瘤防治杂志 2014 年 21卷 22期