目的 构建对利妥昔单抗(Rituximab)耐药的淋巴瘤细胞株,并对其表型特征进行分析,为解决Rituximab的耐药问题提供新的思路.方法 采用“梯度加药法”在体外构建对Rituximab耐药的人淋巴瘤细胞株Daudi-R.细胞毒性检测试剂盒检测Rituximab诱导亲代和耐药淋巴瘤细胞的补体依赖的细胞毒作用(complement dependent cytotoxicity,CDC)、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediatedcytotoxicity,ADCC),Annexin Ⅴ/PI双染检测Rituximab对亲代细胞和抵制细胞的诱导凋亡作用,流式细胞术检测耐药细胞表面CD20、CD55和CD59的表达量,蛋白质印迹法检测耐药细胞株细胞内凋亡调节蛋白的表达量.结果 10、2和0.4 μg/mL的Rituximab能以CDC效应分别杀伤(86.4±4.08)％、(78.79±6.91)％和(62.87±4.12)％的Daudi-WT细胞,而对Daudi-R细胞的杀伤效应分别下降至(26.23±42.53)％(t=25.08,P＜0.001)、(24.67±1.49)％ (t=15.43,P＜0.001)和(17.99±2.33)％(t=18.98,P＜0.001).二抗交联的Rituximab诱导Daudi-WT和Daudi-R的凋亡率分别为(26.11±2.78)％和(16.11±3.50)％,t=3.877,P=0.018.诱导耐药后3d,Daudi-R表面CD20的相对表达量为Daudi-WT细胞表面(0.73±0.07)倍(Dunnettttest I-J=-0.29,SE=0.091,P=0.035),

作者：王文廉；万里新；屈中玉

来源：中华肿瘤防治杂志 2015 年 22卷 3期