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目的 研究瞬时感受器电位离子通道(transient receptor potential vani1loid 1,TRPVl)阻滞剂Capsazepine对人肝癌HepG2细胞凋亡的机制.方法 采用MTT法检测浓度分别为0.01、0.1、1、25、100 μmol/L Capsazepine作用于HepG2细胞24 h后对细胞生长的影响;Hoechst 33258染色法观察0.1和10 μmol/L Capsazepine作用于HepG2细胞24 h后细胞的形态学改变;流式细胞术观察0.1和10 μmol/L Capsazepine作用于HepG2细胞24 h后细胞的凋亡率和周期的变化;实时荧光定量PCR技术(real time-PCR)、蛋白质印迹法和激光共聚焦法检测0.1和10 μmol/L Capsazepine作用于HepG2细胞24 h后,细胞中离子通道受体蛋白TRPV1,以及凋亡相关因子p53,Bcl-2和Bax在mRNA和蛋白水平的表达情况.结果 随着药物浓度的增大,Capsazepine对体外培养的HepG2细胞有抑制增殖作用,且具有剂量相关性;0.01、0.1、1、25、100 μmol/L的Capsazepine作用于HepG2细胞24 h后,HepG2细胞存活率分别为84.77%、73.83%、70.58%、61.42%和48.48%,F=176.523,P<0.001.流式细胞术检测显示,Capsazepine可致HepG2细胞阻滞于G0/G1期,并诱导其凋亡;0.1与10 μmol/L的Capsazepine作用于HepG2细胞24 h,与对照组相比,G0/G1期细胞比例分别为(65.48±0.04)%和(72.14±0.30)

作者:韩璐;狄翠霞;毛爱红;颜家玮;张红

来源:中华肿瘤防治杂志 2015 年 22卷 10期

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韩璐;狄翠霞;毛爱红;颜家玮;张红
来源:
中华肿瘤防治杂志 2015 年 22卷 10期
标签:
瞬时感受器电位离子通道 Capsazepine HepG2细胞 细胞凋亡 transient receptor potential vani1loid 1 Capsazepine HepG2 cells Cell apoptosis
目的 研究瞬时感受器电位离子通道(transient receptor potential vani1loid 1,TRPVl)阻滞剂Capsazepine对人肝癌HepG2细胞凋亡的机制.方法 采用MTT法检测浓度分别为0.01、0.1、1、25、100 μmol/L Capsazepine作用于HepG2细胞24 h后对细胞生长的影响;Hoechst 33258染色法观察0.1和10 μmol/L Capsazepine作用于HepG2细胞24 h后细胞的形态学改变;流式细胞术观察0.1和10 μmol/L Capsazepine作用于HepG2细胞24 h后细胞的凋亡率和周期的变化;实时荧光定量PCR技术(real time-PCR)、蛋白质印迹法和激光共聚焦法检测0.1和10 μmol/L Capsazepine作用于HepG2细胞24 h后,细胞中离子通道受体蛋白TRPV1,以及凋亡相关因子p53,Bcl-2和Bax在mRNA和蛋白水平的表达情况.结果 随着药物浓度的增大,Capsazepine对体外培养的HepG2细胞有抑制增殖作用,且具有剂量相关性;0.01、0.1、1、25、100 μmol/L的Capsazepine作用于HepG2细胞24 h后,HepG2细胞存活率分别为84.77%、73.83%、70.58%、61.42%和48.48%,F=176.523,P<0.001.流式细胞术检测显示,Capsazepine可致HepG2细胞阻滞于G0/G1期,并诱导其凋亡;0.1与10 μmol/L的Capsazepine作用于HepG2细胞24 h,与对照组相比,G0/G1期细胞比例分别为(65.48±0.04)%和(72.14±0.30)