目的 探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)在Ras癌基因诱导体内肝肿瘤发生中的作用.方法 采用H-ras12V转基因肝癌小鼠模型,原位灌流法分离3个月龄雄鼠肝细胞和DCF-DA染色,流式细胞术检测肝细胞中的ROS水平;免疫荧光测定试剂盒检测7个月龄雄鼠肝组织ROS水平.对3和7个月龄雄鼠肝组织及肝肿瘤组织进行总蛋白提取,蛋白质印迹法检测ERK、p-ERK、p53、p21和Caspase-3的表达水平.结果 流式细胞检测结果表明,3个月龄转基因雄鼠肝细胞中的ROS水平为7.81±0.53,比非转基因雄鼠肝细胞的1.00±0.16显著升高,t=21.31,P＜0.001.免疫荧光检测表明,7个月龄转基因雄鼠肿瘤周围(P)组织中的ROS水平为18.25±4.41,比非转基因雄鼠肝(Wt)组织的2.42±0.61显著升高,t=6.16,P=0.004;比转基因雄鼠肿瘤(T)组织的3.18±1.75也显著升高,t=5.50,P=0.005.蛋白质印迹法检测表明,3个月龄转基因雄鼠肝组织中的p-ERK水平为5.36±0.32,比非转基因雄鼠肝组织的0.08±0.04显著升高,t=16.55,P=0.003.7个月龄转基因雄鼠肿瘤组织中p-ERK蛋白水平为22.09±6.57,比非转基因雄鼠肝组织的0.08±0.02显著升高,t=5.80,P=0.004;比转基因雄鼠肿瘤周围组织的8.60±3.23也显著升高,t=3.19,P=0.033;7个月龄转基因雄鼠肿瘤组织中p53蛋白水平为4.86±2.18,

作者：姚亮；李慧玲；董建一；崔海鹏；王福金；王爱国；王靖宇

来源：中华肿瘤防治杂志 2015 年 22卷 12期