目的 探讨结肠癌细胞株RKO中Annexin A5对ERK1/2 MAPK-Bax凋亡通路的影响.方法 慢病毒转染人结肠癌RKO细胞后进行稳定细胞株筛选;用流式凋亡和Hoechst 33258实验探究Annexin A5沉默前后的细胞株凋亡情况;采用RT-PCR法及蛋白质印迹法验证Annexin A5沉默前后ERK1/2、Bax和Bcl-2的mRNA与蛋白表达量的变化.结果 实验组相对于空白对照组Annexin A5的mRNA相对表达量从1.010±0.017下降到0.056±0.005,下降了(95.34±1.54)%,F=2 320.600,P<0.000 1.Annexin A5沉默前后的细胞凋亡率分别为(24.87±6.18)%和(10.7±2.66)%,沉默后凋亡率较之前明显下降,t=3.57,P=0.023.Annexin A5沉默后Bax的mRNA相对表达量从1.000±0.000下降到0.732±0.034,下降了(26.79±3.41)%,F=9.884,P<0.05;但蛋白相对表达量无明显变化,P=0.945;Bcl-2 mRNA相对表达量从1.000±0.000上升到1.592±0.085,上升了(59.17±8.49)%,F=84.026,P<0.001;蛋白相对表达量从0.671±0.018上升到1.580±0.019上升了(135.78±8.89)%,F=2 195.872,P<0.000 1.磷酸化后的ERK1/2蛋白相对表达量从0.917±0.062上升到1.041±0.045,上升了(13.75±5.88)%,F=6.948,P<0.05.结论 Annexin A5本身可能影响或参与了肿瘤细胞的凋亡过程,ERK1/2 MAPK凋亡通路可能
作者:高丕尧;李通;高枫;甘嘉亮
来源:中华肿瘤防治杂志 2015 年 22卷 18期