目的 蟾蜍灵(Bufalin)是中医抗癌药物蟾酥的有效成分之一,但其抗肿瘤的机制并不十分清楚.本研究通过分析不同浓度Bufalin对食管癌TE13细胞株迁移距离、MEK1/2及其活化形式P-MEK1/2和基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMP)表达的影响,初步探讨Bufalin抑制食管癌TE13细胞迁移能力的作用机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethyhhiazol-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法测定细胞药物毒性,细胞划痕实验分别测量不同浓度(0、10、25、50和100 nmol/L)Bufalin处理组食管癌TE13细胞的迁移距离.蛋白质印迹法及免疫细胞化学法检测MEK1/2和P-MEK1/2蛋白的表达.逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测MMP-2、MMP-9 mRNA的表达情况.结果 MTT法结果显示,Bufalin药物最大无毒浓度(TC0)为100 nmol/L.细胞划痕实验结果显示,不同浓度Bufalin处理组在划痕36 h后与对照组相比迁移的距离不同,随着Bufalin浓度的增加,细胞迁移距离下降,100 nmol/L迁移距离最小(F=243.163,P<0.01),Bufalin能有效抑制食管癌细胞迁移距离.蛋白质印迹法及免疫细胞化学检测结果显示,Bufalin对MEK1/2蛋白的表达无影响,但能显著抑制其活化形式P-MEK1/2的表达,并呈剂量依赖性,随Buf
作者:张玲玲;韩金薇;王晓琳;王小玲;刘月平
来源:中华肿瘤防治杂志 2016 年 23卷 13期