目的 DBO(6,8-dichloro-2,3-dihydro-3-hydroxymethyl-1,4-benzoxazine)作为雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)抑制剂,可诱导人脐静脉内皮细胞发生自噬,促进其凋亡,但是DBO对白血病细胞是否亦具有同样的作用却不明确.本研究旨在探讨DBO对人慢性髓系白血病K562细胞的增殖、自噬与凋亡的影响.方法 常规方法复苏、传代培养K562细胞,设置对照组(DMSO)、DBO处理组.处理24、48和72 h后收集细胞,采用蛋白质印迹法检测LC3蛋白的表达.细胞免疫荧光实验检测LC3斑点的表达;透射电镜观察细胞自噬现象.CCK-8比色法检测K562细胞的活性和增殖能力.细胞周期实验检测K562细胞分裂能力.Annexin V FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡.结果 蛋白质印迹结果显示,K562细胞经雷帕霉素处理后LC3Ⅱ蛋白水平表达升高,p62蛋白水平表达降低;经50 μmol/L DBO处理24、48和72 h后,LC3Ⅱ和p62蛋白水平表达与雷帕霉素处理后结果相似,并呈时间依赖性.K562细胞经10、25和50 μmol/L处理后,LC3-Ⅱ蛋白水平表达升高,p62蛋白水平表达降低,呈剂量依赖性,而使用自噬抑制剂3-MA后LC3Ⅱ蛋白表达降低,P62蛋白表达升高.细胞免疫荧光实验显示,DBO作用72 h后,与对照组相比,DBO处理组LC3斑点的表达量增加.透射电镜观察结果显示,与对照

作者：廖琼；孙玉梅；姜夏薇；李珊；王希；白艳梅；任霞；王大本；姜国胜

来源：中华肿瘤防治杂志 2017 年 24卷 19期