目的 肝星状细胞的活化是肝纤维化过程中的重要事件,其活化受多种细胞因子及细胞内信号转导系统的调节.本研究通过上调PTEN表达观察其对血小板衍生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)诱导肝星状细胞活化的抑制作用及其信号转导机制.方法 将实验分为对照组、PDGF组(正常细胞给予PDGF刺激)、PTEN+PDGF组(PDGF作用于成功转染PTEN质粒的细胞)、空载体+PDGF组(PDGF作用于成功转染空载体质粒的细胞)、PTEN质粒转染组和空载体质粒转染组,采用蛋白质印迹法对各组细胞α-SMA、Ⅰ型胶原、PI3K、Akt和p-Akt表达水平进行检测.采用倒置荧光显微镜对肝星状细胞PTEN质粒转染组及空载体质粒转染组绿色荧光蛋白表达进行检测;用蛋白质印迹法检测肝星状细胞对照组、PTEN质粒转染组和空载体质粒转染组中PTEN蛋白表达;用RT-PCR方法检测PTENmRNA表达.结果 含PTEN基因的质粒及空载体质粒转染LX2细胞48 h后可见明显绿色荧光蛋白表达,两组表达GFP的细胞占总细胞比例均＞80％.PTEN转染组PTEN蛋白(P=0.001)和mRNA(P=0.018)表达较对照组及空载体转染组均显著上升;空载体转染组与对照组PTEN mRNA表达差异无统计学意义,P=0.114;PDGF刺激组PTENmRNA较对照组有显著下降(P=0.023),且PDGF刺激与PTEN转染对PTEN mRNA表达的影响有交
作者：刘顺芳；黄婷婷；邱红
来源：中华肿瘤防治杂志 2017 年 24卷 20期
