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目的 恶性肿瘤在生长过程中会出现肿瘤内部缺氧微环境,缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)和缺氧诱导因子2α(hypoxia-inducible factor 2α,HIF-2α)等因子能够适应细胞内缺氧微环境,并对多种基因进行调控,促进肿瘤细胞增殖、迁移侵袭以及放化疗抵抗等.本研究旨在探讨siRNA沉默HIF-2α后对人肝癌细胞株HepG2增殖、侵袭和细胞周期素D1 (Cyclin D1)表达的影响.方法 200 μmol/L氯化钴(CoCl2)诱导细胞模拟缺氧,作为低氧组,HIF-2α siRNA转染缺氧环境下HepG2细胞,分为低氧+HIF-2α siRNA组、低氧+Control siRNA组,Real-timePCR、蛋白质印迹法检测转染48 h后各组细胞中HIF-2a、Cyclin D1的mRNA和蛋白表达,MTT法检测HepG2细胞增殖,流式细胞术观察细胞周期分布,侵袭试验观察细胞侵袭能力.结果 转染特异性HIF-2α siRNA于HepG2细胞后,低氧+ HIF-2α siRNA组HIF-2α和Cyclin D1 mRNA相对表达量分别为0.557±0.082和0.352±0.049,显著低于低氧组1.127±0.069和0.740±0.068,t值分别为13.092和11.391,均P<0.001;HIF-2α和Cyclin D1蛋白相对表达量分别为0.018±0.005和0.338±0.054,显著低于低氧组0.077±0.010和0.613±0.047,t值分别为12.728和9.411,均P<0.001;低氧+HIF-2α siRNA组HepG2细

作者:李伟伟;耿晓松;孙建伟;张彩凤;申保生;宋新文

来源:中华肿瘤防治杂志 2018 年 25卷 7期

知识库介绍

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作者:
李伟伟;耿晓松;孙建伟;张彩凤;申保生;宋新文
来源:
中华肿瘤防治杂志 2018 年 25卷 7期
标签:
肝癌 缺氧诱导因子2α RNA干扰 细胞增殖 细胞周期素D1
目的 恶性肿瘤在生长过程中会出现肿瘤内部缺氧微环境,缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)和缺氧诱导因子2α(hypoxia-inducible factor 2α,HIF-2α)等因子能够适应细胞内缺氧微环境,并对多种基因进行调控,促进肿瘤细胞增殖、迁移侵袭以及放化疗抵抗等.本研究旨在探讨siRNA沉默HIF-2α后对人肝癌细胞株HepG2增殖、侵袭和细胞周期素D1 (Cyclin D1)表达的影响.方法 200 μmol/L氯化钴(CoCl2)诱导细胞模拟缺氧,作为低氧组,HIF-2α siRNA转染缺氧环境下HepG2细胞,分为低氧+HIF-2α siRNA组、低氧+Control siRNA组,Real-timePCR、蛋白质印迹法检测转染48 h后各组细胞中HIF-2a、Cyclin D1的mRNA和蛋白表达,MTT法检测HepG2细胞增殖,流式细胞术观察细胞周期分布,侵袭试验观察细胞侵袭能力.结果 转染特异性HIF-2α siRNA于HepG2细胞后,低氧+ HIF-2α siRNA组HIF-2α和Cyclin D1 mRNA相对表达量分别为0.557±0.082和0.352±0.049,显著低于低氧组1.127±0.069和0.740±0.068,t值分别为13.092和11.391,均P<0.001;HIF-2α和Cyclin D1蛋白相对表达量分别为0.018±0.005和0.338±0.054,显著低于低氧组0.077±0.010和0.613±0.047,t值分别为12.728和9.411,均P<0.001;低氧+HIF-2α siRNA组HepG2细