目的 Survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成员,具有肿瘤特异性,只表达于肿瘤和胚胎组织,且与肿瘤细胞的分化增殖及浸润转移密切相关.利用慢病毒转染短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)技术抑制人RL95-2子宫内膜癌细胞Survivin基因表达,探讨沉默Survivin基因对人子宫内膜癌细胞移植瘤生长及肿瘤组织内细胞凋亡影响.方法 建立人子宫内膜癌细胞裸鼠移植瘤模型,构建基因靶向Survivin-shRNA序列,利用慢病毒载体介导转染细胞,设置实验组、对照组和空白组,其中实验组原位注射Survivin-shRNA慢病毒至肿瘤组织内,对照组原位注射阴性对照shR-NA慢病毒至肿瘤组织内,空白组未予以特殊处理.每隔1周计量注射治疗后移植瘤体积变化并绘制生长曲线.注射治疗4周后,处死全部裸鼠,应用qPCR检测肿瘤组织内Survivin mRNA水平的变化,蛋白质印迹法检测凋亡相关Survivin蛋白和Caspase-3蛋白表达情况,Tunel法检测组织细胞凋亡情况,HE染色观察肿瘤部位组织学变化.结果 皮下接种裸鼠RL95-2子宫内膜癌细胞2周即可成瘤,成瘤大小约1.0 cm×0.8 cm.注射治疗4周后,qPCR检测结果显示,实验组、对照组和空白组Survivin mRNA表达分别为0.243±0.032、0.995±0.027和1.004±0.021,3组间均值差异有统计学意义,F=795.623,P<0.001;两组间比较显示,实
作者:李会影;王慧智;原丹丹;张子旸;尹秀艳
来源:中华肿瘤防治杂志 2018 年 25卷 16期