目的 体外研究发现S100A4蛋白可与p53蛋白结合,但至今尚不清楚S100A4与p53蛋白能否在活细胞内发生相互作用.本研究旨在确定S100A4与p53在活细胞内的相互作用.方法 采用光学生物传感器体外检测S100A4蛋白与p53蛋白的结合能力.应用激光共聚焦显微镜的荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术检测Hela细胞(人宫颈癌细胞株)内S100A4与p53蛋白的相互作用.结果 光学生物传感器体外检测发现,野生型S100A4蛋白与p53蛋白结合能力强,对照组突变型S100A4蛋白则失去与p53蛋白的结合能力.采用FRET技术发现,表达CFP-S100A4和p53-YFP融合蛋白的Hela细胞中,细胞核内p53-YFP的荧光强度衰减后,CFP-S100A4的荧光强度增强,发生FRET;而细胞质中没有发生FRET.作为对照,表达突变CFP-mS100A4-C和p53-YFP融合蛋白,或表达S100A4和YFP的Hela细胞内没有发生FRET,表明S100A4和p53之间的相互作用发生在活细胞的细胞核中.结论 活细胞内S100A4可直接与细胞核中的p53相互作用,这可能是S100A4蛋白在体内发挥生物学作用的分子基础,提示阻断S100A4的钙结合位点可能是潜在的抗肿瘤转移作用靶点.
作者：刘臻；孟莹；王慧君；Philip S.Rudland；Roger Barraclough；张述
来源：中华肿瘤防治杂志 2020 年 27卷 6期
