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目的 多配体蛋白聚糖-1(syndecan-1,SDC-1)作为乙酰肝素酶-1(heparanase-l,HPA-1)的作用靶点,参与调控癌细胞的恶性行为.本研究旨在探讨HPA-1对人肝癌细胞SDC-l脱落的诱导作用、脱落型SDC-1对细胞增殖和侵袭的影响及SDC-1单克隆抗体的干预效果.方法 本研究分为HPA-1小干扰RNA(siHPA-1)转染组,阴性对照小干扰RNA(siNC)转染组,阴性对照小干扰RNA转染后的SDC-1单克隆抗体(siNC+ SDC-1 IP)处理组和阴性对照小干扰RNA转染后的对照IgG(siNC+ IgG IP)处理组.采用siHPA-1、siNC脂质体法转染人肝癌细胞SMMC7721,实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测干扰效果.RTFQ-PCR、蛋白质印迹法和酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测HPA-1下调对SDC-1的mRNA表达,以及对细胞质、细胞核、细胞膜SDC-1蛋白水平及SDC-1脱落的影响.采用SDC-1单克隆抗体消除脱落型SDC-1,CCK-8及Transwell法分析SDC-1耗竭对细胞增殖和侵袭的影响.蛋白质印迹法检测SDC-1耗竭后ERK/Akt及FAK/Paxillin信号的磷酸化.结果 siHPA-1下调HPA-1的mRNA(t=20.138,P<0.001)和蛋白(t=10.567,P<0.001)表达,差异有统计学意义.与siNC转染组比较,siHPA-1转染组细胞SDC-1的mRNA表达及细

作者:于生金;吕慧明;张贺;鞠薇薇;闫高波;林黎娟

来源:中华肿瘤防治杂志 2020 年 27卷 14期

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作者:
于生金;吕慧明;张贺;鞠薇薇;闫高波;林黎娟
来源:
中华肿瘤防治杂志 2020 年 27卷 14期
标签:
肝癌 多配体蛋白聚糖-1 乙酰肝素酶-1 增殖 侵袭
目的 多配体蛋白聚糖-1(syndecan-1,SDC-1)作为乙酰肝素酶-1(heparanase-l,HPA-1)的作用靶点,参与调控癌细胞的恶性行为.本研究旨在探讨HPA-1对人肝癌细胞SDC-l脱落的诱导作用、脱落型SDC-1对细胞增殖和侵袭的影响及SDC-1单克隆抗体的干预效果.方法 本研究分为HPA-1小干扰RNA(siHPA-1)转染组,阴性对照小干扰RNA(siNC)转染组,阴性对照小干扰RNA转染后的SDC-1单克隆抗体(siNC+ SDC-1 IP)处理组和阴性对照小干扰RNA转染后的对照IgG(siNC+ IgG IP)处理组.采用siHPA-1、siNC脂质体法转染人肝癌细胞SMMC7721,实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测干扰效果.RTFQ-PCR、蛋白质印迹法和酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测HPA-1下调对SDC-1的mRNA表达,以及对细胞质、细胞核、细胞膜SDC-1蛋白水平及SDC-1脱落的影响.采用SDC-1单克隆抗体消除脱落型SDC-1,CCK-8及Transwell法分析SDC-1耗竭对细胞增殖和侵袭的影响.蛋白质印迹法检测SDC-1耗竭后ERK/Akt及FAK/Paxillin信号的磷酸化.结果 siHPA-1下调HPA-1的mRNA(t=20.138,P<0.001)和蛋白(t=10.567,P<0.001)表达,差异有统计学意义.与siNC转染组比较,siHPA-1转染组细胞SDC-1的mRNA表达及细