目的 放射治疗是结直肠癌综合治疗的重要组成部分,尤其是对于中晚期和术前放疗患者,目前结直肠癌对放疗敏感性较差,急需新的增敏靶点.本研究旨在探讨沉默Msi1(Musashi1)通过靶向调节p21对结直肠癌细胞放疗敏感性影响.方法 蛋白质印迹法检测结直肠癌HT29、HCT116细胞及正常肠上皮细胞CCD841中Msi1蛋白表达,选择Msi1高表达的细胞系作为后续研究的靶细胞,将含有2种不同干扰序列慢病毒分别转染该细胞后,用qRT-PCR筛选出沉默效果最好的细胞株作为沉默组.实验中将结肠癌细胞分为空白组(Blank)、阴性对照组(NC)、沉默组1(Msi1-shRNA1)和沉默组2(Msi1-shRNA2).克隆形成实验检测沉默Msi1基因对结直肠癌细胞放射敏感性的影响.MTS法检测6 GyX射线照射后结直肠癌细胞增殖情况,并计算抑制率.流式细胞术检测6 GyX射线照射后细胞凋亡情况.蛋白质印迹法检测沉默Msi1后p21蛋白表达水平,双荧光素酶实验证实Msi1与下游基因p21 3'-UTR相互作用.结果 结直肠癌HT29、HCT116细胞中Msi1蛋白表达水平高于正常肠上皮细胞CCD841,分别为(1.000±0.181)、(1.102±0.219)和(0.106±0.051),符合正态分布,其中HCT116细胞中Msi1蛋白表达量最高(F=32.42,P=0.000 6),因此选择HCT116细胞作为靶细胞进入后续实验.Msi1-shRNA1组的沉默效果优于Ms

作者：高超；韩春；王澜；刘树堂；丁博月；田彦明；张翼

来源：中华肿瘤防治杂志 2020 年 27卷 15期