目的 探讨外泌体血小板反应蛋白2(THBS2)通过Wnt/β-catenin信号通路影响宫颈癌细胞上皮-间质转化(EMT)、增殖、侵袭和迁移能力.方法 采用THBS2过表达载体稳定转染至宫颈癌SiHa细胞中,获得THBS2-LV组和THBS2-NC组,分别提取外泌体.采用透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析技术和蛋白质印迹法检测外泌体,定量聚合酶链式反应(qPCR)和蛋白质印迹法检测外泌体内THBS2表达情况,细胞计数盒8(CCK8)法检测外泌体对SiHa细胞增殖的影响.分别将exoTHBS2-LV和exoTHBS2-NC与宫颈癌SiHa细胞共培养72 h,蛋白质印迹法检测EMT相关蛋白和Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平.采用划痕实验及Transwell实验检测外泌体对SiHa细胞迁移及侵袭能力的影响.结果 电镜下,THBS2细胞的外泌体大部分呈椭圆形或圆形,直径50～200 nm.蛋白质印迹检测结果显示,2组的TSG101、HSP70和CD9表达均呈阳性.qPCR结果显示,外泌体THBS2-LV表达量为14.78±5.04,高于对照组(1.00±0.00),差异有统计学意义,t=4.737,P=0.009.蛋白质印迹法中exoTHBS2-LV表达量为1.09±0.11,高于对照组(0.41±0.16),t=5.811,P=0.004.CCK8实验结果显示,空白组(1.03±0.08)及exoTHBS2-NC组(0.97±0.11)细胞活力高于exoTHBS2-LV组(0.80±0.03),差异有统计学意义,F=6.552,P=0.031.蛋

作者：黄艳丹；卢艳；韦敏；李丹；陈彬

来源：中华肿瘤防治杂志 2022 年 29卷 19期