目的 探讨DNA损伤诱导转录因子4(DDIT4)在肺腺癌细胞中的表达及其对细胞增殖、凋亡的影响和可能机制.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹检测DDIT4在肺腺癌细胞系(H1299和A549)及正常肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)中表达;慢病毒转染抑制A549细胞中DDIT4表达,分为DDIT4敲低慢病毒(sh-DDIT4,分为sh-DDIT4#1、sh-DDIT4#2和sh-DDIT4#3)组和转染空病毒(NC)组.蛋白质印迹检测细胞中DDIT4沉默效果;CCK-8、平板克隆形成实验检测sh-DDIT4对肺腺癌细胞增殖能力的影响;TUNEL凋亡实验检测sh-DDIT4对肺腺癌细胞凋亡能力的影响;Transwell和划痕实验检测sh-DDIT4对肺腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响.结果 qRT-PCR结果显示,DDIT4 mRNA在BEAS-2B、H1299和A549细胞中相对表达水平分别为1.01±0.04、2.19±0.09和3.10±0.09,差异有统计学意义,F=183.00,P<0.001.蛋白质印迹结果显示,DDIT4蛋白在BEAS-2B、H1299和A549中表达水平分别为0.39±0.02、0.98±0.01和1.00±0.02,差异有统计学意义,F=457.00,P<0.001.DDIT4 mRNA在NC、sh-DDIT4#1、sh-DDIT4#2和sh-DDIT4#3组中表达量分别为1.01±0.02、0.58±0.02、0.59±0.02和0.27±0.04,差异有统计学意义,F=150.40,P<0.001;DDIT4蛋白在各组中表达量分别为1.12±0.01、0.61±0.02、
作者:栾艳超;彭海军;韩青松;白峰;王明正
来源:中华肿瘤防治杂志 2022 年 20期