目的 揭示circNDUFA10(has circ 0001118)在膀胱癌组织中的表达情况,并进一步探究其是否通过调控第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)/蛋白激酶B(Akt)/人血管内皮生长因子A(VEGF-A)信号通路抑制膀胱癌血管新生.方法 收集2016-08-02-2018-07-26于中山大学孙逸仙纪念医院行根治性膀胱切除术的膀胱癌患者癌组织和配对癌旁正常组织标本62例,qRT-PCR检测circNDUFA10在临床组织标本及人正常膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)和人膀胱癌细胞系(T24、UM-UC-3和5637)的表达.选取T24和UM-UC-3细胞进行siRNA转染以沉默circNDUFA10的表达,分别获得si-NC组、si-circNDUFA10#1组和si-circNDUFA10#2组.成管实验和Transwell实验分别检测各组细胞成管长度及细胞迁移情况.RNA pull-down实验检测miR-20b-5p与circNDUFA10的结合情况.选取T24和UM-UC-3细胞进行inhibitor和siRNA转染,分别获得NC inhibitor组、miR-20b-5p inhibitor组和miR-20b-5p inhibitor+si-circNDUFA10组.qRT-PCR检测miR-20b-5p对PTEN表达的影响.蛋白质印迹法检测circNDUFA10沉默后PTEN及其下游相关蛋白(Akt、p-Akt)的表达.qRT-PCR和ELISA实验检测circNDUFA10沉默后VEGF-A的表达.结果 circNDUFA10在膀胱癌组织中的相对表达量(-2.450±0.192)低于癌
作者:艾乐;冯梓贤;阴艺娜;苏民;李志花
来源:中华肿瘤防治杂志 2022 年 29卷 23期