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目的 构建带有EGFP标记含人P21启动子的双荧光素酶报告基因载体.方法 从人血白细胞DNA中克隆P21启动子,用于控制firefly荧光素酶的表达;renilla荧光素酶基因和EGFP基因用IRES连接,在CMV启动子控制下表达:上述元件和基因克隆至载体pLL3.7中,应用酶切和测序的方法进行鉴定正确后转染至293FT细胞观察EGFP表达.结果 经酶切、测序证实成功构建了带有EGFP标记的含人P21启动子的双荧光素酶报告基因的载体,并成功表达EGFP.结论 含人P21启动子的双荧光素酶报告基因的载体成功构建,为下一步的药物筛选打下基础.

作者:陈荣誉;郑文岭;吴清华;张宝;马文丽

来源:热带医学杂志 2011 年 11卷 3期

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作者:
陈荣誉;郑文岭;吴清华;张宝;马文丽
来源:
热带医学杂志 2011 年 11卷 3期
标签:
双荧光素酶报告基因 P21启动子 EGFP
目的 构建带有EGFP标记含人P21启动子的双荧光素酶报告基因载体.方法 从人血白细胞DNA中克隆P21启动子,用于控制firefly荧光素酶的表达;renilla荧光素酶基因和EGFP基因用IRES连接,在CMV启动子控制下表达:上述元件和基因克隆至载体pLL3.7中,应用酶切和测序的方法进行鉴定正确后转染至293FT细胞观察EGFP表达.结果 经酶切、测序证实成功构建了带有EGFP标记的含人P21启动子的双荧光素酶报告基因的载体,并成功表达EGFP.结论 含人P21启动子的双荧光素酶报告基因的载体成功构建,为下一步的药物筛选打下基础.