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目的 建立双重实时荧光PCR检测副溶血性弧菌和创伤弧菌的方法.方法 在GenBank数据库查找序列并比对后设计tdh和vvhA基因引物和探针.对PCR反应退火温度、引物、探针、Mg2+、Taq DNA聚合酶及dNTPs浓度进行优化,确定反应体系和反应条件,并对新建方法的特异性、灵敏度等方面进行分析,对模拟样品进行检测.结果 建立了双重实时荧光PCR检测副溶血性弧菌和创伤弧菌的方法.该方法的特异性较好,检测限为103 CFU/ml.结论 建立的双重荧光PCR方法可快速、灵敏、特异地检测副溶血性弧菌和创伤弧菌.

作者:金玉娟;甘莉萍;杨慧;李静媚;陈应坚

来源:热带医学杂志 2014 年 14卷 10期

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作者:
金玉娟;甘莉萍;杨慧;李静媚;陈应坚
来源:
热带医学杂志 2014 年 14卷 10期
标签:
副溶血性弧菌 创伤弧菌 实时荧光PCR Vibrio parahaemolyticus Vibrio vulnificus real-time PCR
目的 建立双重实时荧光PCR检测副溶血性弧菌和创伤弧菌的方法.方法 在GenBank数据库查找序列并比对后设计tdh和vvhA基因引物和探针.对PCR反应退火温度、引物、探针、Mg2+、Taq DNA聚合酶及dNTPs浓度进行优化,确定反应体系和反应条件,并对新建方法的特异性、灵敏度等方面进行分析,对模拟样品进行检测.结果 建立了双重实时荧光PCR检测副溶血性弧菌和创伤弧菌的方法.该方法的特异性较好,检测限为103 CFU/ml.结论 建立的双重荧光PCR方法可快速、灵敏、特异地检测副溶血性弧菌和创伤弧菌.