目的 探讨靶向沉默KIAA1199基因的表达对人结肠癌SW620细胞生长能力的影响.方法 运用RNA干扰(shRNA)技术构建携带靶向抑制KIAA1199分子的慢病毒载体LV3-KIAA1199-shRNA并感染人结肠癌细胞株SW620为实验组(shKIAA1199),携带无义序列的对照慢病毒载体LV3-NC-shRNA为阴性对照组(shNC),未转染的细胞为空白对照组(MOCK).72 h后用荧光显微镜观察慢病毒的感染效率,RT-PCR法验证慢病毒感染后KI-AA1199 mRNA在MOCK、shNC和shKIAA1199各组细胞中的表达水平,并用嘌呤霉素筛选KIAA 1199静默和阴性对照的稳转细胞.用MTT法检测MOCK、shNC和shKIAA1199各组细胞活力,流式细胞仪分别检测三组细胞的凋亡率和细胞周期的变化.结果 携带靶向干扰KIAA1199基因的慢病毒感染人结肠癌细胞株SW620后,能有效下调KIAA1199在细胞内的表达水平并成功筛选KIAA 1199静默的SW620稳转细胞;与MOCK和shNC组比较,shKIAA1199组细胞活力减少(P＜0.05),细胞凋亡率明显升高(P＜0.05),处于细胞周期中G1期的细胞数量比例明显下降(P＜0.05),G2/M期细胞比例增加(P＜0.05).结论 下调KIAA 1199基因的表达可抑制SW620细胞的增殖,促进该细胞的凋亡,使该肿瘤细胞的生长周期受到阻滞.
作者：董晴晴；许慈；蔡懿婷；王碧君；戴强；朱黎明
来源：热带医学杂志 2017 年 17卷 4期
