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以RT-PCR方法,从经ConA诱导的林麝(Moschus berezovskii)外周血淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)总RNA中扩增出编码林麝IFN-γ的基因并将其克隆到pMD18-T载体上.经筛选、菌落PCR鉴定、测序、序列分析,证实为林麝IFN-γ基因编码序列(全长498 bp).将其重组到原核表达载体pGEX4T-1,并在大肠杆菌BL21中实现了高效表达.表达产物以GST(Glutathione S-transferase)融合蛋白的形式存在,表达量约占细菌总蛋白的26.9

作者:陈桂兰;徐柳;岳碧松;邹方东

来源:四川动物 2007 年 26卷 1期

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作者:
陈桂兰;徐柳;岳碧松;邹方东
来源:
四川动物 2007 年 26卷 1期
标签:
林麝 IFN-γ cDNA克隆 融合蛋白 蛋白纯化
以RT-PCR方法,从经ConA诱导的林麝(Moschus berezovskii)外周血淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)总RNA中扩增出编码林麝IFN-γ的基因并将其克隆到pMD18-T载体上.经筛选、菌落PCR鉴定、测序、序列分析,证实为林麝IFN-γ基因编码序列(全长498 bp).将其重组到原核表达载体pGEX4T-1,并在大肠杆菌BL21中实现了高效表达.表达产物以GST(Glutathione S-transferase)融合蛋白的形式存在,表达量约占细菌总蛋白的26.9